藥品生產(chǎn)中滅菌工藝的驗(yàn)證與滅菌效果的監(jiān)控，是影響產(chǎn)品安全性的關(guān)鍵要素，也是藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）檢查中的關(guān)注重點(diǎn)。無菌制劑的過度滅菌可能引入更多雜質(zhì)，誘發(fā)質(zhì)量與安全隱患，而滅菌不充分則可能因微生物污染而導(dǎo)致藥害事件。今天，就帶大家簡(jiǎn)單了解下衡量滅菌工藝的標(biāo)尺——滅菌生物指示劑的相關(guān)知識(shí)。

 滅菌工藝驗(yàn)證和滅菌效果監(jiān)控中使用的生物指示劑，是衡量滅菌工藝的一把尺，此類產(chǎn)品的質(zhì)量直接影響到滅菌工藝的關(guān)鍵性技術(shù)參數(shù)和產(chǎn)品安全性。

D值與Z值的意義與重要性：

   D值和Z值是評(píng)價(jià)滅菌生物指示劑產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵性技術(shù)參數(shù)。D值即在規(guī)定滅菌溫度下，將生物指示劑產(chǎn)品中耐熱微生物殺滅90%（下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位）所需的時(shí)間。D值越大，耐熱微生物殺滅速度越慢，該菌株的耐熱性越強(qiáng)。Z值是指使某種微生物的D值下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位里，滅菌溫度需要升高的度數(shù)，Z值越大，因溫度上升而取得的殺菌效果越小。

D值如何測(cè)定：

　實(shí)驗(yàn)步驟如下：產(chǎn)品在121℃下滅菌，設(shè)計(jì)不同的暴露時(shí)間，覆蓋全部陽性反應(yīng)、全部陰性反應(yīng)和部分陽性、陰性反應(yīng)的區(qū)間。每個(gè)暴露時(shí)間點(diǎn)所用的待測(cè)生物指示劑樣品為20支，每次暴露的樣品批次和數(shù)量相同。每次暴露程序完成后，立即按壓玻璃管，使培養(yǎng)基與含菌紙片充分接觸，55℃培養(yǎng)48h，記錄陽性/陰性反應(yīng)的指數(shù)。試驗(yàn)重復(fù)3次，計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。

　存活孢子計(jì)數(shù)是計(jì)算D值的關(guān)鍵參數(shù)，存活孢子計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性取決于待測(cè)樣本的均勻性、耐熱菌株孢子與載體的分離程度、熱擊的溫度和時(shí)間、稀釋劑的選擇等。

　稀釋液中的離子強(qiáng)度會(huì)直接影響孢子的復(fù)蘇率，因此推薦使用滅菌純化水作為稀釋液。試驗(yàn)優(yōu)化時(shí)需以滅菌生理鹽水，含吐溫-80的滅菌生理鹽水等作為稀釋劑進(jìn)行孢子復(fù)蘇率的考察。

　此外，濕熱滅菌生物指示劑產(chǎn)品所選取的耐熱菌株嗜熱脂肪芽孢桿菌的遺傳背景、產(chǎn)品包裝材質(zhì)和復(fù)蘇培養(yǎng)基適用性也會(huì)對(duì)D值測(cè)定的結(jié)果產(chǎn)生一定影響，但產(chǎn)品制作工藝中耐熱菌株的選擇、耐熱菌株與載體的包被、菌株耐熱能力對(duì)產(chǎn)品D值也會(huì)產(chǎn)生一些波動(dòng)影響。

 小結(jié)：

　滅菌生物指示劑產(chǎn)品的D值本身取決于產(chǎn)品制作過程中耐熱菌株的抗性，D值測(cè)定結(jié)果收到暴露溫度、暴露壓力、升溫或降溫速率、溫度寶東興、產(chǎn)品包裝形式、復(fù)蘇培養(yǎng)基的適用性等因素影響。